图1. Illumina GAIIx
测序原理:
测序时将基因组DNA的随机片段附着到光学透明的玻璃表面(即Flow cell),这些DNA片段经过延伸和桥式扩增后,在Flow cell上形成了数以亿计Cluster,每个Cluster是具有数千份相同模板的单分子簇。然后利用带荧光基团的四种特殊脱氧核糖核苷酸,通过可逆性终止的SBS(边合成边测序)技术对待测的模板DNA进行测序。这种新方法确保了高精确度和真实的一个碱基接一个碱基的测序,排除序列方面的特殊错误,为同聚物和重复序列的测序提供了一个很好的解决方案。
性能特点:
• 测序通量高:每个测序反应能达到90G以上的数据通量; • 准确率高: ≥ 98.5%,同时也有效地解决了多聚重复序列的读取问题; • 低成本:比传统毛细管测序技术成本的1%还低; • DNA序列的读取长度不断增加,当前达到300 bp; • 可以进行Pair-End双向测序,目前Pair-End文库插入片段大小范围可由200bp到10kb; • 每张芯片有8个通道,每个通道可单独测序一个样品,也可以把多个样品混合在一起测序。
应用领域:
• 全基因组测序(重测序) • BAC重测序 • 转录组测序 • 宏基因组测序 • 基因表达谱 • 小RNA测序 • ChIP-Seq测序 |