从某一特定组织细胞中获得高质量的microRNA。 microRNAs(miRNA)是一类21~23核苷酸小非编码RNAs,其通过与靶基因的3'非翻译区间结合抑制靶基因表达,或者使靶基因转录本降解,起到调节子的作用,具有基因表达调控功能。
技术方法:
采用Ambion的mirVana miRNA Isolation Kit来对细胞或者组织样品进行miRNA的抽提。该试剂盒采用了改良的玻璃纤维滤膜方法来快速回收样品中的全部RNA,其中也包括miRNA。运用变性裂解液、酸-酚:氯仿处理,然后通过玻璃纤维滤膜来纯化总RNA再用胶纯化富集miRNA,这样可以准确定量RNA来估计质量,确认用于进一步实验的可靠性。针对于甲醛固定石蜡包埋(FFPE)的组织,我们可以采用Ambion的RecoverALL Total Nucleic Acid Isolation Kit,这个试剂盒可以专门提取FFPE样品中DNA、RNA,其中也包括了全部的miRNA,可直接用于miRNA表达图谱分析。如果是针对于抗凝的全血,我们可以是用Ambion的RiboPure-Blood Kit来提取小分子RNA。另外我们还可以使用mirVana PARIS Kit来直接提取样品中的天然蛋白和所有的RNA,包括小分析RNA(miRNA、snRNA和snoRNA),从而满足研究者研究miRNA的同时观察蛋白水平关联的要求。 应用领域: 组织细胞中microRNA的定性、定量研究,基因表达调控研究。涉及到分子遗传学和疾病基因组学等多个研究领域。
样本要求:
新鲜血液/组织/培养细胞(离体/收集后非冷冻状态下0.5-2小时内)、液氮保存的组织/分离白细胞/培养细胞、RNAlater充分浸透保护的组织/分离白细胞/培养细胞(低温保存一个星期之内)、Trizol充分裂解后的组织/分离白细胞/培养细胞(低温保存3天之内)、经福尔马林固定的组织石蜡包埋块(优先)或石蜡切片。 服务内容:
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