从某一特定组织细胞中获得的总RNA作为模板利用反转录酶进行反转录成为cDNA。
技术方法:
利用polyT(24),随机引物N9或基因特异性引物和M-MLV反转录酶进行cDNA的合成,一次反应RNA用量为1ug, 反应体系为20μl。反转录引物的选择根据具体实验要求而定,通常情况下采用polyT+N9, 对于只研究有限基因的项目,可采用基因特异性引物。利用cDNA特异的POLR2A扩增引物对反转录产物进行扩增质检。有特殊要求请来电咨询。 应用领域: 涉及分子生物学和基因组学表达水平分析及基因功能研究的以RNA为分析对象的实验研究领域。
样本要求:
不同组织细胞来源的总RNA, 要求有清晰的电泳图片。 服务内容:
检测实例:
琼脂糖凝胶电泳检测 针对cDNA利用POLR2A引物扩增的产物。 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M Marker为DL500,1-10号为10个逆转录样本,POLR2A扩增片段大小为126bp。 依所用引物不同有以下几种转录方式 随机引物N9 |