|
AmpAll®试剂盒主要用于基因组DNA的全基因组扩增。
利用等温聚合酶的独特性质，在恒温下实现对样本全基因组DNA的高产量和高质量的均匀扩增。该特殊DNA聚合酶具有与模板很强的结合能力，能在结合的模板上连续延伸70kb以上, 这使得扩增产物长度可达100kb。同时，这种酶具有3’-> 5’外切酶活性，错误率仅为5 x 10-6，大约比Taq DNA聚合酶低100倍，这保证了扩增的高保真性。该试剂盒要求模板DNA不能严重降解，而且每个反应的模板DNA用量最好大于20ng，以减少因模板量太少而造成等位基因的不平衡扩增。正常情况下，20 µl的反应体系可产生>10µg的扩增产物，可稀释50倍后用于后续的DNA分析。
基因组扩增试剂盒实验结果：
DNA抽提结果：  （1）REPLI-g UltraFast Mini Kit（25），实验后按说明书1：25稀释。 （2）AmpAll® 全基因组扩增试剂盒——DNA，实验后按说明书原位5被稀释，做后续实验再进行10被稀释。 （考虑到A-2和重采样本原液浓度比较低，做扩增的时候加了5ul模板，A-1和正常样本取1ul模板。） （3）AmpAll® 全基因组扩增试剂盒——毛囊，实验后按说明书原位3被稀释，做后续实验再进行10被稀释。（两个毛囊） 取上述实验结果5ul跑电泳，DL2000 marker是1ul。 
试剂盒定制流程：
试剂盒中包括具体的试剂说明、标准的实验体系条件。 |
